原理
改良半葉法系將植物對稱葉片的一部分遮光或取下置于暗處,另一部分則留在光下進行光合作用,過一定時間后,在這兩部分葉片的對應部位取同等面積,分別烘干稱重。因為對稱葉片的兩對應部位的等面積的干重,開始時被視為相等,照光后葉片重量超過暗中的葉重,超過部分即為光合作用產(chǎn)物的產(chǎn)量,并通過一定的計算可得到光合作用強度。
儀器藥品
分析天平 烘箱
剪刀 稱量皿
刀片 金屬模板
紗布 錫紙
三氯乙酸
操作步驟
1.選擇測定樣品
在田間選定有代表性植株葉片(如葉片在植株上的部位、葉齡、受光條件等)20張,用小紙牌編號。
2.葉子基部處理
為了不使選定葉片中光合作用產(chǎn)物往外運,而影響測定結果的準確性,可采用下列方法進行處理:
(1) 可將葉子輸導系統(tǒng)的韜皮部破壞。如棉花等雙子葉植物的葉片,可用刀片將葉柄的外皮環(huán)割約0.5cm寬。
(2) 如小麥、水稻等單子葉植物,由于韌皮部和木質部難以分開處理,可用剛在開水中浸過的紗布或棉花做成的夾子,將葉子基部燙傷一小段即可(一般用90℃以上的開水燙20秒)。
(3) 由于棉花葉柄木質化程度低,葉柄易被折斷。用開水燙,又難以掌握燙傷的程度,往往不是燙得不夠便是燙得過重而葉片下垂,改變了葉片的角度。因此可改用化學方法來環(huán)割,選用適當濃度的三氯乙酸,點涂葉柄以阻止光合產(chǎn)物的輸出。三氯乙酸是一種強烈的蛋白質沉淀劑,滲入葉柄后可將篩管生活細胞殺死,而起到阻止有機養(yǎng)料運輸?shù)淖饔。三氯乙酸的濃度,視葉的幼嫩程度而異。以能明顯灼傷葉柄,而又不影響水分供應,不改變葉片角度為宜。一般使用5%三氯乙酸。
為了使燙后或環(huán)割等處理后的葉片不致下垂,影響葉片的自然生長角度,可用錫紙或塑料管包圍之。使葉片保持原來著生角度。
3.剪取樣品
葉基部處理完畢后,即可剪取樣品,記錄時間,開始光合作用測定。一般按編號次序分別剪下對稱葉片的一半(主脈不剪下),按編號順序夾于濕潤的紗布中,貯于暗處。過4─5小時后,再依次剪下另外半葉,同樣按編號夾于濕潤紗布中,兩次剪葉的速度應盡量保持一致,使各葉片經(jīng)歷相等的照光時數(shù)。
4.稱重比較
將各同號葉片之兩半按對應部位疊在一起,在無粗葉脈處放上已知面積(如棉花可用1.5×2cm)的金屬模板,用刀片沿邊切下兩個葉塊,分別置于照光及暗中的兩上稱量皿中,80─90℃下烘至恒重(約5小時),在分析天平上稱重比較。
5.計算結果
葉片干重差之部和(mg)除以葉面積(換算成dm2,1dm2=100cm2)及照光時數(shù),即得光合作用強度,以干物質,mg/(dm2?h)表示之。
計算公式如下:
由于葉內貯存的光合產(chǎn)物一般為蔗糖和淀粉等,可將干物質重量乘系數(shù)1.5,得二氧化碳同化量,單位為CO2,mg/(dm2?h)。
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