動物細胞的融合：

1、動物細胞融合：兩個或多個動物細胞結(jié)合形成一個細胞的過程。融合后形成的具有原來兩個或多個細胞遺傳信息的單核細胞，稱為雜交細胞。
2、誘導方法：化學法（聚乙二醇），滅活的病毒，物理法（離心、振動、電激等）。
3、動物細胞融合的意義：克服了遠緣雜交的不親和性，成為研究細胞遺傳、細胞免疫、腫瘤和生物新品種培育等的重要手段。


動物細胞融合與植物體細胞雜交的比較：

細胞工程	植物體細胞雜交	動物細胞融合
理論基礎	細胞的全能性、細胞膜的流動性	細胞增殖、細胞膜的流動性
融合前處理	酶解法去除細胞壁 （纖維素酶、果膠酶）	注射特定抗原，免疫處理正常小鼠
誘導手段	物理法：離心、振動、電激 化學法：聚乙二醇（PEG）	物理法：離心、振動、電激 化學法：聚乙二醇 生物法：滅活的病毒（滅活的仙臺病毒）
誘導過程	第一步：原生質(zhì)體的制備（酶解法） 第二步：原生質(zhì)體融合（物、化法） 第三步：雜種細胞的篩選和培養(yǎng) 第四步：雜種植株的誘導與鑒定	正常小鼠免疫處理動物細胞的融合 （物、化、生法）雜交瘤細胞的篩 選與培養(yǎng)專一抗體檢驗陽性細胞培 養(yǎng)單克隆抗體的提純
用途和意義	克服遠緣雜交的不親和障礙， 大大擴展雜交的親本組合范圍 應用：白菜??甘藍等雜種植株	（1）制備單克隆抗體 （2）診斷、治療、預防疾病，例如“生物導彈”治療癌癥

知識點撥：

動物細胞融合與植物原生質(zhì)體融合的原理基本相同，誘導動物細胞融合的方法與植物原生質(zhì)體融合的方法類似，常用的誘導因素有聚乙二醇、滅活的病毒、電刺激等。

知識拓展：

1、在誘導劑的作用下進行細胞的誘導融合，形成的雜種細胞有三種：AA型、BB型、AB型。只有AB型才是我們所需要的雜種細胞，所以需要用選擇性培養(yǎng)基進行篩選。
2、相比較植物體細胞雜交，動物細胞融合特有的誘導方式是用滅活的病毒處理，其他物理化學誘導融合的方法與植物體細胞雜交過程中原生質(zhì)體融合方法相同。


相關高中生物知識點：基因診斷與基因治療

基因診斷與基因治療：

1、基因診斷技術(shù)的原理
（1）基因診斷：是用放射性同位素（如³²P）、熒光分子等標記的DNA分子做探針，利用DNA分子雜交原理，鑒定被檢測樣本上的遺傳信息，從而達到檢測疾病的目的。
（2）基因診斷的對象主要包括病原微生物的侵入，先天遺傳性疾病和后天基因突變引起的疾病等方面。目前，基因診斷已在病毒性肝炎、艾滋病等傳染病的診斷中發(fā)揮了不可替代的作用。
（3）通過基因診斷的方法檢測其發(fā)生突變的基因，對于臨床診斷、了解發(fā)病機理和疾病治療都具有重要的意義。
（4）基因診斷的應用：傳統(tǒng)診斷遺傳疾病的方法是通過表現(xiàn)型來推測基因型�；�因診斷則是從基因著手來推斷表現(xiàn)型，這種方法不受細胞類型和發(fā)病年齡的限制，可用于一切遺傳病的診斷。如半乳糖血癥是一種先天性糖代謝缺陷癥，通過基因診斷，發(fā)現(xiàn)病人缺少一個合成半乳糖轉(zhuǎn)移酶的基因。如果把半乳糖轉(zhuǎn)移酶的基因轉(zhuǎn)入缺乏這一基因的人體中，便可以使他的缺陷癥狀得到改善。
2、基因治療的發(fā)展前景
（1）基因治療：就是把特定的外源基因?qū)�入有基因缺陷的細胞中，從而達到治療疾病的目的。

（2）基因治療惡性腫瘤的方案有兩種：
①殺死腫瘤細胞??將抑制癌細胞增生的基因轉(zhuǎn)入到癌細胞內(nèi)，不僅可以阻斷癌細胞繁殖，還可以誘導它自殺死亡；或?qū)⒁欢慰梢砸种瓢┗�因轉(zhuǎn)錄的DNA序列導入癌細胞，使癌基因不能表達，癌細胞也就不能增殖。
②將提高人體免疫力的基因?qū)�入免疫系統(tǒng)，以提高人體防御功能，由人體免疫系統(tǒng)殺死癌細胞。
（3）基因治療的步驟：選擇治療基因→將治療基因和運載體結(jié)合導入到患者體內(nèi)→治療基因在細胞內(nèi)正常表達。

知識拓展：

1、基因芯片：是將大量特定序列的DNA片段有序的固定在尼龍膜、玻片或硅片上，從而能大量、快速、平行地對DNA分子的堿基序列進行測定和定量分析。
2、基因芯片的應用：用于尋找和鑒定與疾病相關的基因；用于傳染病的檢測。例腫瘤細胞的檢測、預測老年癡呆、糖尿病，艾滋病、前列腺癌等。



相關高中生物知識點：基因工程的應用

基因工程的應用：

1、植物基因工程：

	外源基因類型及舉例	成果舉例
抗蟲轉(zhuǎn)基因植物	抗蟲基因：Bt毒蛋白基因、蛋白酶抑制劑基因、淀粉酶抑制劑基因、植物凝集素基因	抗蟲水稻、抗蟲棉、抗蟲玉米
抗病轉(zhuǎn)基因植物	(1)抗病毒基因：病毒外殼蛋白基因、病毒復制酶基因(2)抗真菌基因：幾丁質(zhì)酶基因、抗毒素合成基因	抗病毒煙草、抗病毒小麥、抗病毒番茄、抗病毒甜椒
抗逆轉(zhuǎn)基因植物	抗逆基因：調(diào)節(jié)細胞滲透壓基因、抗凍蛋白基因、抗除草劑基因	抗鹽堿和抗干旱的煙草、抗寒番茄、抗除草劑的大豆和玉米
改良品質(zhì)的轉(zhuǎn)基因植物	優(yōu)良性狀基因：提高必需氨基酸含量的蛋白質(zhì)編碼基因、控制番茄成熟的基因、與花青素代謝有關的基因	高賴氨酸玉米、耐儲存番茄、新花色矮牽牛

2、動物基因工程：

	外源基因類型及舉例	成果舉例
提高生長速度的轉(zhuǎn)基因動物	外源生長激素基因	轉(zhuǎn)基因綿羊、轉(zhuǎn)基因鯉魚
改善畜產(chǎn)品品質(zhì)的轉(zhuǎn)基因動物	腸乳糖酶基因	乳汁中含乳糖較少的轉(zhuǎn)基因牛
生產(chǎn)藥物的轉(zhuǎn)基因動物	藥用蛋白基因+乳腺蛋白基因的啟動子	乳腺生物反應器
作器官移植供體的轉(zhuǎn)基因動物	外源的抗原決定基因表達的調(diào)節(jié)因子或除去供體的抗原決定基因	無免疫排斥的轉(zhuǎn)基因豬

3、基因診斷與基因治療
(1)基因診斷：DNA分子雜交法（即DNA探針法），該方法是根據(jù)堿基互補配對原則，把互補的雙鏈 DNA解開，把單鏈的DNA小片段用同位素、熒光分子或化學發(fā)光催化劑等進行標記，之后同被檢測的DNA 中的同源互補序列雜交，從而檢出所要查明的DNA或基因。
(2)基因治療的方法：基因置換、基因修復、基因增補、基因失活等。
(3)基因治療的途徑
①體外基因治療：先從病人體內(nèi)獲得某種細胞進行培養(yǎng)，然后在體外完成基因轉(zhuǎn)移，再篩選成功轉(zhuǎn)移的細胞擴增培養(yǎng)，最后重新輸入患者體內(nèi)。如腺苷酸脫氨酶基因的轉(zhuǎn)移。
②體內(nèi)基因治療：用基因工程的方法，直接向人體


知識拓展：

1、Bt毒蛋白基因產(chǎn)生的Bt毒蛋白并無毒性，進入昆蟲消化道被分解成多肽后產(chǎn)生毒性。
2、青霉素是謗變后的高產(chǎn)青霉菌產(chǎn)生的，不是通過基因工程改造的工程菌產(chǎn)生的。
3、動物基因工程的應用主要體現(xiàn)在提高動物生長速度、改善畜產(chǎn)品品質(zhì)、用轉(zhuǎn)基因動物生產(chǎn)藥物等方面。 4、動物基因工程主要為了改善畜產(chǎn)品的品質(zhì)，不是為了產(chǎn)生體型巨大的個體。
5、乳腺生物反應器產(chǎn)量高、質(zhì)量好、成本低、易提取，在高價值蛋白質(zhì)的生產(chǎn)上比工廠化生產(chǎn)更具有優(yōu)越性二。
6、用基因工程的方法，使外源基因得以高效表達的菌類細胞株系一般稱為“工程菌”。
7、基因診斷是采用基因檢測的方法來判斷患者是否出現(xiàn)了基因異�；驍y帶病原體。基因治療指利用正�；�因置換或彌補缺陷基因的治療方法。
8、基因工程與環(huán)境保護
親子鑒定：利用醫(yī)學、生物學和遺傳學的理論和技術(shù)，從子代和親代的形態(tài)構(gòu)造或生理機能方面的相似特點，分析遺傳特征，判斷父母與子女之間是否是親生關系。
使用國產(chǎn)制劑進行親子鑒定
鑒定親子關系目前用得最多的是DNA分型鑒定。人的血液、毛發(fā)、唾液、口腔細胞及骨頭等都可以用于親子鑒定，十分方便。
利用DNA進行親子鑒定，只要作十幾至幾十個DNA位點作檢測，如果全部一樣，就可以確定親子關系，如果有3個以上的位點不同，則可排除親子關系，有一兩個位點不同，則應考慮基因突變的可能，加做一些位點的檢測進行辨別。DNA親子鑒定，否定親子關系的準確率幾近100%，肯定親子關系的準確率可達到99.99%。
9、基因芯片的基本原理：就是最基本的DNA分子雜交，利用基因芯片檢測某種基因時，先將待測樣品制成熒光標記的DNA探針，讓它與基因芯片上已知序列的DNA片段雜交，雜交信號經(jīng)放大后輸入計算機進行統(tǒng)計分析，這樣就可以檢測出樣品DNA序列。
用途：用來檢測基因表達的變化、分析基因序列、尋找新的基因和新的藥物分子。利用基因芯片，可以比較同一物種不同個體或物種之間，以及同一個體在不同生長發(fā)育階段、正常和疾病狀態(tài)下基因表達的差異，尋找和發(fā)現(xiàn)新的基因，研究基因的功能以及生物體在進化、發(fā)育、遺傳等過程中的規(guī)律。


相關高中生物知識點：植物的組織培養(yǎng)技術(shù)

植物組織培養(yǎng)技術(shù)：

1、植物組織培養(yǎng)過程：
（1）原理：植物細胞具有全能性。
（2）過程：

2、用途：
(1)微型繁殖
微型繁殖就是用于快速繁殖優(yōu)良品神的植物組織培養(yǎng)技術(shù)，也叫快速繁殖技術(shù)。繁殖過程中的分裂方式是有絲分裂，親、子代細胞內(nèi)DNA不變，所以能夠保證親、子代遺傳特性不變。
(2)作物脫毒
作物脫毒是利用莖尖、根尖等無毒組織，進行微型繁殖，所獲幼苗是無毒的。
(3)人工種子：通過組織培養(yǎng)技術(shù)，可把植物組織的細胞培養(yǎng)成在形態(tài)及生理上與天然種子胚相似的胚狀體，也叫作體細胞胚。這種體細胞胚有于葉、根、莖分生組織的結(jié)構(gòu)�？茖W家把體細胞胚包埋在膠囊內(nèi)形成球狀結(jié)構(gòu)，使其具備種子機能。所以，人工種子是一種人工制造的代替天然種子的顆粒體，可以直接播種于田間。
①制作方法：人工種子是利用植物組織培養(yǎng)獲得胚狀體、不定芽、頂芽和腋芽等，然后包上人丁種皮就形成了人工種子，如圖：

②優(yōu)點：可使在自然條件下不結(jié)實或種子昂貴的植物得以繁殖；保持親本的優(yōu)良性狀，因該過程為無性繁殖；節(jié)約糧食，減少種子的使用；可以控制添加一些物質(zhì)，如除草劑、農(nóng)藥、促進生長的激素、有益菌等。 周期短，易儲存和運輸，不受氣候和地域的限制。
(4)細胞產(chǎn)物的工廠化生產(chǎn)：從人工培養(yǎng)的愈傷組織細胞中提取某種成分，如紫草素、香料等。

知識點撥：

1、植物組織培養(yǎng)的注意事項：
（1）接種時應注意的事項：①接種室要消毒；②無菌操作；③接種時要防止交叉污染；④接種完立刻蓋好瓶口。
（2）外植體接種前，需要將接種室、接種箱滅菌和對外植體消毒的操作：
①接種前一天，將接種室的四個角落用甲醛溶液和高錳酸鉀熏蒸。
②接種前1小時，在接種室內(nèi)用噴霧器噴灑來蘇水；桌椅也用來蘇水擦拭；接種箱內(nèi)用甲醛溶液和高錳酸鉀熏蒸。
③將滅菌室和接種箱內(nèi)用紫外燈滅菌。
④接種前，操作者用肥皂清洗雙手，擦干，再用酒精棉球擦拭雙手。
⑤用次氯酸鈉溶液將外植體消毒。
2、在離體的植物器官、組織或細胞脫分化形成愈傷組織的過程中，需要的條件：①消毒滅菌；②一定濃度的植物激素；③適宜的溫度；④充足的養(yǎng)料。
3、影響植物組織培養(yǎng)的因素：①培養(yǎng)基配制；②外植體選��；③激素的運用；④消毒；⑤溫度、pH、光照。
4、植物組織培養(yǎng)中植物激素使用：物組織培養(yǎng)中關鍵性激素是生長素和細胞分裂素；同時使用生長素和細胞分裂素時，兩者用量的比例影響植物細胞的發(fā)育方向；先使用細胞分裂素，后使用生長素，細胞既分裂5、植物組織培養(yǎng)過程中分化成的幼苗需要移栽，移栽時，應先將培養(yǎng)瓶的封口膜打開一段時間，讓試管苗在培養(yǎng)間生長幾日；移栽時需用流水清洗根部的培養(yǎng)基；最后幼苗需移植到消過毒的新環(huán)境下生活一段時間，等幼苗長壯后再移栽到土壤中。

知識拓展：

1、植物細胞的全能性
(1)概念：具有某種生物全部遺傳信息的任何一個細胞，都具有發(fā)育成完整生物體的潛能。
(2)原理：細胞內(nèi)含有本物種的全部遺傳信息。
(3)全能性表達條件：具有完整的細胞結(jié)構(gòu)，處于離體狀態(tài)，提供一定的營養(yǎng)、激素和其他適宜外界條件。
2、作物新品種培育
（1）單倍體育種：
①過程：植株（AaBb）通過減數(shù)分裂得到花粉（AB、Ab、aB、ab四種類型）；對花粉進行花藥離體培養(yǎng)（技術(shù)是植物組織培養(yǎng)）；得到單倍體植株；對其幼苗時期進行秋水仙素處理；得到了正常的純合二倍體植株（AABB、Aabb、aaBB、aabb四種類型）。
②優(yōu)點：明顯縮短育種年限
（2）突變體利用：在組織培養(yǎng)中會出現(xiàn)突變體，通過從有用的突變體中選育出新品種（如篩選抗病、抗鹽、含高蛋白的突變體）
3、細胞產(chǎn)物的生產(chǎn)：通過能夠產(chǎn)生對人們有利的產(chǎn)物的細胞進行組織培養(yǎng)，從而讓它們能夠產(chǎn)生大量的細胞產(chǎn)物。地位：是培育轉(zhuǎn)基因植物、植物體細胞雜交培育植物新品種的最后一道工序。
4、植物組織培養(yǎng)的優(yōu)點：
①不受生長季節(jié)限制地繁殖植物。
②不攜帶病毒。
③培養(yǎng)周期短。
④可用組培中的愈傷組織制取特殊的生化制品。
⑤可短時間大量繁殖，用于拯救瀕危植物。
⑥可誘導之分化成需要的器官，如根和芽。
⑦解決有些植物產(chǎn)種子少或無的難題。如將香蕉進行組培得到人工種以方便移種。
5、培養(yǎng)基的制作：制備MS固體培養(yǎng)基→外植體消毒→接種→培養(yǎng)→移栽→栽培。肉湯培養(yǎng)基以有機營養(yǎng)為主，MS培養(yǎng)基則需提供大量無機營養(yǎng)。制備MS固體培養(yǎng)基操作過程：配制母液時，無機物中大量元素濃縮10倍，微量元素濃縮100倍；激素類、維生索類以及用量較小的有機物一般可按1mg/mL的質(zhì)量濃度單獨配制成母液；將分裝好的培養(yǎng)基連同其他器械一起進行高壓蒸汽滅菌。
6、消毒和滅菌：外植體可以用酒精消毒；操作前手需用酒精消毒；培養(yǎng)基需用高壓蒸汽滅菌。



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